1、 null
2、 细胞内多数RNA以核蛋白形式与蛋白质结合,因此提取时需有效分离并去除蛋白质,而苯酚法在此过程中存在局限性,难以完全避免蛋白残留,影响RNA纯度和后续实验结果。
3、 将细胞加入含十二烷基磺酸钠(SDS)的缓冲液中,再加入等体积水饱和酚,剧烈振荡后离心,分为上层水相和下层酚相。核酸进入水相,而变性的蛋白质则进入酚相或在两相界面形成凝胶状沉淀层,从而实现核酸与蛋白质的有效分离。
4、 在RNA提取过程中,选用变性剂时,CTAB法相较于异硫氰酸胍(RIZOL试剂法)和SDS(改良热硼酸法)具有更高的提取效率。
5、 采用CTAB法提取RNA时,利用CTAB作为变性剂,配合PVP和β-巯基乙醇协同作用,使蛋白质变性并抑制RNase活性;通过无水乙醇或异丙醇沉淀去除杂蛋白及总核酸,最终实现RNA的选择性分离与纯化。
